尊龙凯时的AnnexinV荧光染料是细胞生物学和医学研究中检测细胞凋亡的重要工具之一。作为膜联蛋白家族的一员,这种细胞蛋白具有依赖钙离子结合阴离子磷脂的特性。尽管其具体的细胞功能尚未完全明确,但已有研究显示它主要参与凝血过程。在分析细胞健康状态时,膜联蛋白V通过特异性结合磷脂酰丝氨酸(PS)来识别凋亡细胞。PS通常位于细胞膜内侧,但在细胞凋亡开始时会翻转至膜外。为了便于检测和定量,膜联蛋白V通常与荧光素、藻胆蛋白或半抗原分子(如生物素)偶联。
核心功能
1. 特异性结合磷脂酰丝氨酸:AnnexinV作为一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白,对细胞膜上的磷脂酰丝氨酸表现出极高的亲和力和特异性。
2. 标记凋亡细胞:在活细胞中,磷脂酰丝氨酸主要位于细胞膜的内侧。凋亡细胞的早期阶段,PS会翻转至外侧,AnnexinV荧光染料能够结合这些暴露的磷脂酰丝氨酸,从而标记出凋亡细胞,尤其是早期凋亡的细胞。
3. 区分凋亡阶段:通常需要与另一种染料如碘化丙啶(PI)结合使用。不同的染色结果能帮助识别细胞状态:
- AnnexinV阳性/PI阴性:早期凋亡细胞
- AnnexinV阳性/PI阳性:晚期凋亡或坏死细胞
- AnnexinV阴性/PI阴性:活细胞
- AnnexinV阴性/PI阳性:坏死细胞或受机械损伤细胞(这种情况更少见,双阳性更常见)。
主要优势
1. 早期检测:能够检测凋亡过程中极早的事件——磷脂酰丝氨酸外翻,远早于细胞形态发生明显变化或DNA断裂,这对研究凋亡的起始机制至关重要。
2. 高灵敏度和特异性:AnnexinV对其靶点磷脂酰丝氨酸具有高度的特异性和亲和力,能可靠地区分凋亡细胞和活细胞。
3. 定量分析:结合流式细胞术时,可以对不同凋亡阶段的细胞进行精确的定量分析。
4. 区分凋亡与坏死:与PI等膜不透过性核酸染料联用,是区分凋亡(尤其是早期)和坏死的常用有效方法之一。
5. 操作相对简便快速:标准的AnnexinV/PI染色流程简单,通常可在1-2小时内完成,适合高通量筛选。
6. 多种检测平台兼容:流式细胞术、荧光显微镜、荧光微孔板读数仪及激光共聚焦显微镜均可用于高效分析。
7. 适用于多种细胞类型:可用于悬浮细胞、贴壁细胞、原代细胞、细胞系等样本。
尊龙凯时的AnnexinV荧光染料凭借其特异性结合凋亡细胞表面暴露磷脂酰丝氨酸的核心功能,具备早期检测、高灵敏度、定量分析、区分凋亡和坏死、操作简便及良好的平台兼容性等显著优势。该染料在基础生命科学和应用医学研究领域广泛应用,尤其在细胞凋亡检测、抗肿瘤药物筛选及机制研究、毒理学评估等方面发挥着不可替代的作用。与膜完整性染料(如PI)的联合使用是其标准应用模式。